( 805) # 22Б2805
Автор(ы): Gibson T. J., Sepaniak M. J.
Заглавие: Оценка разделения фрагментов ДНК методом капиллярного электрофореза с использованием красителей различных степеней и типов связывания
Оригинальное заглавие: Evaluation of capillary electrophoretic separation of DNA fragments using dyes of differing degrees and modes of binding
Язык: Англ.
Источник: Pittsburgh Conf. Anal. Chem. and Appl. Spectrosc., New Orleans, La, March 1-5, 1998: PITTCON'98: Book Abstr., 1998, стр.1803р
Ключевые слова: разделение; ДНК; электрофорез; красители; флуоресценция

Реферат: Проведено сравнит. изучение флуоресцентных бис-красителей-вставок (БКВ) при анализе ДНК, POPO-3 и TOTO-1, и наиболее часто используемого красителя этидиум бромида (ЭБ). БКВ дают значит. усиление ФЛ. Показано, что если эффективность и разрешение остаются хорошими в широком диапазоне отношений ввода метки (ВМ) при использовании ЭБ, то отношение ВМ при использовании БКВ нужно тщательно контролировать внутри оптим. диапазона, чтобы не было сильного разрушения работоспособности системы. Таким образом, использование ЭБ предпочтительно при ВМ непосредственно в КЛ. Однако степень ВМ при - ЭБ влияет на подвижность фрагментов, а в оптим. диапазоне ВМ подвижность фрагментов не зависит от отношения пар оснований: краситель с БКВ, что имеет преимущество при определении последовательности ДНК методом капиллярного электрофореза. Тип связывания БКВ ограничивает выбор компонентов буф. р-ра. Нек-рые катионы могут затруднять способность БКВ к сильному связыванию фрагментов ДНК. Так, Tris-буф. р-ры можно использовать с ЭБ, но они дают плохую разделит. способность с БКВ. Наличие мест множественного связывания в молекулах БКВ может привести к дополнит. размыванию полосы за счет увеличения АД на стенках и вз-вий между фрагментами