( 806) # 22Б2806
Автор(ы): Schwinefus J. J., Morris M. D.
Заглавие: Уширение полосы и формы полос ДНК в капиллярном электрофорезе с постоянным током и обращением поля
Оригинальное заглавие: Band spreading and band shapes in DC and field inversion capillary electrophoresis of DNA
Язык: Англ.
Источник: Pittsburgh Conf. Anal. Chem. and Appl. Spectrosc., New Orleans, La, March 1-5, 1998: PITTCON'98: Book Abstr., 1998, стр.010
Ключевые слова: разделение; ДНК; электрофорез

Реферат: При разделении линейных двухцепочечных ДНК в р-рах разб. полимеров методом капиллярного электрофореза (КЭ) с полем постоянного тока наблюдается заметная асимметрия полос фрагментов, содерж. более 10{4} пар оснований. Асимметрия объясняется быстрым переплетением и медленным расплетением комплексов ДНК - полимер. Импульсные поля уменьшают ширину полосы, однако механизм этого процесса неизвестен. Изучена форма пиков ДНК при КЭ с импульсным и постоянным полем в р-рах гидроксиэтилцеллюлозы (ГЭЦ) на примере лямбда двухцепочечных ДНК (48,5*10{3} пар оснований). Изучена зависимость ширины и асимметрии полосы от длины капилляра и конц-ии ГЭЦ. При КЭ с полем постоянного тока ширина полосы увеличивается с ростом конц-ии ГЭЦ, а асимметрия не зависит от конц-ии ГЭЦ и длины капилляра. Инверсия поля уменьшает ширину полосы, за исключением сильных полей. В последнем случае джоулев нагрев и индуцир. полем агрегация нейтрализуют эффект сужения полосы. Изучена динамика поведения ДНК при КЭ с помощью высокоскоростной видеофлуоресцентной микроскопии. Миним. протяженность изученной ДНК наблюдали в разб. р-рах ГЭЦ, она не увеличивается с ростом конц-ии ГЭЦ. Средняя протяженность в импульсных полях сравнима со средней протяженностью в стационарных полях. Центр массовой скорости ДНК осциллирует периодически в полях с постоянным током. Во время инверсии поля центр массовой скорости ДНК близко следует за циклом поля. Значительно различающаяся миграция ДНК в полях двух типов коррелирует с изменениями ширины полосы и объясняет наблюдаемые тенденции формы полосы